I. Khái niệm về
nuôi cấy mô tế bào
- Khái niệm: NCMTB thực vật là
phương pháp tách rời TB, mô ra khỏi cơ thể thực vật rồi đem nuôi cấy trong môi
trường thích hợp có thành phần dinh dưỡng gần giống như trong cơ thể sống để tế
bào, mô có thể sống, phân chia, biệt hoá thành mô, cơ quan và có thể phát triển
thành cây hoàn chỉnh
- Điều kiện:
+ Tế bào, mô đem nuôi cấy phải sống và có khả năng
phân chia mạnh mẽ.
II. Cơ sở khoa học của phương pháp nuôi cấy mô tế
bào.
- Biểu hiện: thông qua 2 quá
trình
+ Quá trình phân
hoá: Là quá trình chuyển hoá các tế bào phôi sinh thành các tế bào chuyên hoá
đảm nhận các chức năng khác nhau.
+ Quá trình phản
phân hoá: Là quá trình biến đổi các tế bào chuyên hoá có chức năng khác nhau
thành tế bào phôi sinh
- Cơ chế: Do hệ gen của tế bào, cơ thể thực vật
quy định.
2 – Kĩ thuật
nuôi cấy mô tế bào.
III. Quy trình công nghệ nhân giống cây trồng bằng
nuôi cấy mô tế bào.
1 – Quy trình.
- Bước 1: Chọn
vật liệu nuôi cấy.
+ Mục đích: Nhằm
có được mẫu nuôi cấy tốt (sạch bệnh, có
khả năng phân chia mạnh mẽ....)
+ Cách tiến
hành: Lấy các mẫu mô phân sinh ở các đỉnh sinh trưởng không bị nhiễm bệnh.
- Bước 2: Khử
trùng.
+ Mục đích: Loại
bỏ các tác nhân gây bệnh, đặc biệt là nấm, vi khuẩn, virut.
+ Cách tiến
hành: Tẩy rửa và khử trùng mẫu nuôi cấy bằng nước sạch và cồn 900.
- Bước 3: Tạo chồi trong môi trường nhân tạo.
+ Mục đích: Kích thích mẫu nuôi cấy hình thành chồi.
+ Cách tiến hành: Nuôi mẫu trong môi trường dinh dưỡng
nhân tạo, thường dùng môi trường MS
- Bước 4: Tạo rễ.
+ Mục đích: Kích thích chồi hình thành rễ để tạo cây
hoàn chỉnh.
+ Cách tiến hành: Tách chồi và cấy chuyển chồi sang
môi trường tạo rễ có bổ sung thêm các chất kích thích sinh trưởng như
ỏ – NAA(ỏ – Napthyl acetic Acid), IBA( Indol Butiric Acid)
- Bước 5: Cấy cây vào môi trường thích ứng
+ Mục đích: Giúp cây thích nghi dần với điều kiện tự
nhiên.
+ Cách tiến hành: Sau khi chồi đã ra rễ thì đem cấy
vào môi trường thích ứng.
- Bước 6: Trồng
cây trong vườn ươm.
+ Mục đích: Giúp
cây thích nghi với môi trường sản xuất.
+ Cách tiến hành: Cấy cây vào vườn ươm
2 – Ý nghĩa.
- Có thể nhân giống cây trồng ở quy mô công nghiệp.
- Có hệ số nhân giống cao.